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qPCR方法與細(xì)菌培養(yǎng)法在無乳鏈球菌和金黃葡萄球菌檢測(cè)的比較

無乳鏈球菌Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus被認(rèn)為是奶牛乳腺炎的重要傳染性病原,然而這兩種病原最近都從奶牛乳房外和環(huán)境中分離出來,表明除乳房以外的其他部位可能有這兩種病原傳播并導(dǎo)致乳房內(nèi)感染。可以使用檢測(cè)乳房外部位病原的診斷方法,但診斷方法仍需要驗(yàn)證。本研究的目的是評(píng)價(jià)丹麥 Mastit4 qPCR檢測(cè)試劑盒和細(xì)菌培養(yǎng) (BC) 方法在來自牛奶和乳頭皮膚樣本中檢測(cè)無乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus中的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)比較。從具有自動(dòng)擠奶系統(tǒng)的8個(gè)無乳鏈球菌陽性的丹麥奶牛場(chǎng)中隨機(jī)選擇了 30-40 頭體細(xì)胞計(jì)數(shù)高的奶牛,從右后方 (n = 287) 收集乳頭皮膚樣品和無菌牛奶樣品用于細(xì)菌培養(yǎng)和 qPCR 檢測(cè)分析,靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)采用貝葉斯統(tǒng)計(jì)分析來評(píng)價(jià)。對(duì)于牛奶樣品,無乳鏈球菌 qPCR檢測(cè)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.97 0.99,而細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.41 1.00。 金黃色葡萄球菌的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為0.95 0.99,而傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.54 0.77。對(duì)于乳頭皮膚樣本,無乳鏈球菌 qPCR檢測(cè)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.97 0.96,而傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.33 1.00。金黃色葡萄球菌的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為0.94 0.98,而傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)的靈敏度(Se) 和特異性 (Sp)分別為 0.44 0.74??傊?,用于檢測(cè)無乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureusqPCR試劑盒靈敏度(Se)比細(xì)菌培養(yǎng)方法要高,這表明 qPCR方法是一種有價(jià)值的方法,可用于檢測(cè)牛奶樣品中的這兩種病原。細(xì)菌培養(yǎng)法與 qPCR方法相比,細(xì)菌培養(yǎng)法在檢測(cè)乳頭皮膚上的無乳鏈球菌(Strep. agalactiae)和金黃色葡萄球菌(Staph. aureus)方面的性能較差,這表明在將這兩種方法作為乳頭皮膚定植菌的常規(guī)檢測(cè)方法時(shí),應(yīng)考慮兩種方法的目標(biāo)條件的差異。細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)的低靈敏度可能會(huì)妨礙使用細(xì)菌培養(yǎng)進(jìn)行皮膚檢測(cè),而 qPCR方法更適合這項(xiàng)檢測(cè)。




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